FATP5脂肪酸轉運蛋白5ELISA試劑盒

標本要求：

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

產品屬性：

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產品僅用于科研標準規格酶標儀

2. 高速離心機

3. 電熱恒溫培養箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。

3.  10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實驗前準備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（2）血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（3）尿液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

（4）細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。

（5）培養細胞

檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

（6）組織標本

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

操作步驟：

1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

GTP活化蛋白(GAP)試劑盒 薏苡素硫氧鈦 synthesis grade2.6-二苯 95%

GTP活化蛋白(GAP)試劑盒 茵芋硫氧鈦 93%2.6-二氟-4-氧苯 95%

載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒 茵芋2-溴-3-羥吡啶  98%2,5-二-2,4-己二烯 97%,含60-100ppm BHT穩定劑

載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒 羊藿次I2--3-羥吡啶 98%2,3-二  97%

糖磷脂酰肌(GPI)試劑盒 羊藿溴化鋰溶液 55 wt. % in H2O2,5-二  97%

糖磷脂酰肌(GPI)試劑盒 羊藿素水質鍶標樣 濃度范圍:2.00(mg/L)，分析標準品3,5-二 97%

美洲商陸素(PWM)試劑盒 銀椴金屬鍶 99.5%2,5-二氧苯  98%

美洲商陸素(PWM)試劑盒 銀杏酚金屬鋰粒 99.9% metals basis2,3-二氟苯 98%

脂多糖/內素(LPS)試劑盒銀杏內酯A溴化鋰溶液 55 wt. % in H2O2,4-二氟苯  98%

脂多糖/內素(LPS)試劑盒銀杏內酯B苯芐酯 CP,98.0%2,5-二氟苯 97%

preptin 試劑盒銀杏內酯C苯 無水級, 99.8%2,5-二苯 98%

preptin 試劑盒銀杏內酯J2,5-二酚 Indicator3,4-二氧苯 97%

過氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒銀杏雙黃氫氧化鋇，一水 99%2,3-二吡啶-4- 95%

過氧化物體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒吲哚化鋇，二水 GR,99.5%2,4-二 97%

載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒隱丹參氫氧化鋇，八水 AR，98%3-乙氧羰苯 97%

載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒隱綠原氫氧化鋇，八水 CP，97%4-乙氧羰苯 97%
FATP5脂肪酸轉運蛋白5ELISA試劑盒新型活細胞核染料( Ex/Em:647/660 nm, bound to DNA)是一種具有細胞膜透性的核染料，其在于核結合之后熒光強度會得到顯著增強。Nuclear View Red 活細胞核染料可以用于染死的或者活的真核細胞的RNA 和DNA，在革蘭氏細菌中同樣也適用。新型活細胞核染料具有如下重要特性：

細胞膜透性，可以穿過幾乎所有的細胞膜，包括哺乳動物細胞和細菌。

極低的熒光背景，未與核結合時，染料的量子產率通常<0.01。

與核結合之后，量子產率通常> 0.4。

活細胞核染料可以在不同的實驗應用中染活細胞或者固定細胞的核，能夠與配備了常規激光激發器或寬帶照明光源的各種熒光檢測設備匹配。

佳的染色探針濃度取決于不同的應用程序類型，此處建議的初始條件是基于驗證的特定細胞類型，具體實驗中應摸索加以調整。

儲存：-20℃，有效期六個月。